一、沃特斯色譜柱的存放:
1.避免干燥存放
色譜柱在使用后或長(zhǎng)時(shí)間不使用時(shí),不能直接暴露在空氣中,否則會(huì)導(dǎo)致填料干燥、開裂或失效。
應(yīng)將色譜柱充滿保存溶劑(通常為甲醇、乙腈或水,具體根據(jù)柱型而定),并密封柱兩端。
2.選擇合適的保存溶劑
反相色譜柱(如C18柱):保存溶劑通常為甲醇或乙腈(純有機(jī)溶劑),避免使用純水(可能滋生微生物)。
正相色譜柱(如硅膠柱):保存溶劑通常為正己烷或庚烷。
特殊柱型:參考柱廠商推薦的保存溶劑(如離子交換柱需保存在特定pH的緩沖液中)。
3.溫度控制
存放環(huán)境應(yīng)避免高溫或低溫極*條件,推薦溫度為室溫(15~25℃)。
長(zhǎng)期存放時(shí),可置于陰涼處,避免陽(yáng)光直射。
4.密封保存
使用專用柱帽或封口裝置密封色譜柱兩端,防止保存溶劑揮發(fā)或污染。
若色譜柱自帶密封閥,確保閥門處于關(guān)閉狀態(tài)。
1.沖洗色譜柱
每次使用后:用適當(dāng)?shù)娜軇_洗色譜柱,清除殘留樣品或雜質(zhì)。
反相柱:先用甲醇-水(50:50)沖洗,再用純甲醇或乙腈沖洗。
正相柱:用正己烷或異丙醇沖洗。
長(zhǎng)期存放前:確保色譜柱內(nèi)無(wú)鹽分、緩沖液或強(qiáng)極性樣品殘留,避免填料污染或堵塞。
2.避免壓力沖擊
使用色譜柱時(shí),緩慢調(diào)節(jié)流速和壓力,避免突然升高壓力導(dǎo)致填料壓縮或損壞。
避免在高壓下直接進(jìn)樣,建議使用樣品預(yù)過(guò)濾器。
3.防止污染
確保流動(dòng)相和樣品經(jīng)過(guò)過(guò)濾(0.22μm或更小孔徑濾膜),避免顆粒物堵塞色譜柱。
定期更換流動(dòng)相,避免微生物滋生(可添加適量防腐劑如疊氮鈉)。
4.控制pH范圍
硅膠基色譜柱(如正相柱)對(duì)pH敏感,避免使用強(qiáng)酸性或強(qiáng)堿性流動(dòng)相(通常pH范圍為2~8)。
反相柱對(duì)pH耐受性較好,但長(zhǎng)期使用極*pH仍可能損傷填料。
5.避免高濃度鹽或緩沖液
高濃度鹽或緩沖液可能沉積在填料表面,導(dǎo)致柱效下降。使用后應(yīng)及時(shí)用純水或有機(jī)溶劑沖洗。
